動物模型的選擇:
選擇適當的實驗動物,一般是小鼠或大鼠,取決於研究問題和模型的可行性。
這兩點是完全摘抄了基礎理論部分,屬於是課題實驗的總綱,沒什麼特別的意義。
更重要的是下面。
確定HK2基因敲除的具體方法!
常見的包括CRISPR/Cas9技術、基因敲除小鼠的胚胎幹細胞等。
只一句話,難度一下子就上來了。
CRISPR/Cas9技術,是一種基因編輯技術,編輯基因,就需要依靠這種技術,但是如何敲除,而且要在敲除後,得到基因小鼠的胚胎幹細胞,一下子就變得迷離起來。
試驗動物在進行了動物試驗後,無法再繁殖,但不代表,實驗動物模型從一開始,就是完成體。
這需要在小鼠受精後的胚胎幹細胞階段,就得將它們取出,進行基因編輯。
然後的操作步驟是:
設計基因編輯工具、基因編輯體外實驗:
在體外對胚胎幹細胞或其他適當的細胞進行基因編輯,驗證編輯工具的有效性。
基因編輯體內實驗:
將編輯過的胚胎幹細胞或基因編輯工具引導到動物體內,通常是小鼠或大鼠的胚胎。
篩選正常的基因編輯體:
透過分子生物學技術,如PCR、Soutotting等,篩選出成功敲除HK2基因的動物。
動物繁殖:
利用成功編輯的胚胎培育出整個基因敲除的動物,通常是透過繁殖和篩選產生基因敲除體的後代。
驗證基因敲除效果:
對產生的基因敲除體進行詳細的分子生物學和生化學分析,確認HK2基因是否被成功敲除。
這些看起來不可能,難度特別高的實驗操作,方子業如今對其一一進行回顧時,覺得難度也不算特別高了。
至少啊,看起來,不是之前看它們那樣,覺得就只是空中樓閣,如夢幻泡影,稍微顯得更加實質化。
這是方子業透過自己的能力,得到了實驗操作可行性的反饋。
既然想了,那就去做啊。
每一個步驟,還需要詳細化,比如說聯絡大型的動物實驗公司,問他們是否可以提供胚胎幹細胞的提取技術,如果不能提供的話,是否可以提供實驗操作的平臺和地址,自己親自去操作。
如果可以提供,那麼他們如何轉運,轉運到哪裡,這些都是問題。
這可不是普通的動物實驗,找一個動物實驗室就直接做了,方子業懷疑,自己很有可能得回漢市,甚至飛魔都和京都,或者是飛羊城,這樣經濟發達,且醫療技術水平和位於國內科研前沿的地方。
但不管怎麼樣,萬事開頭難,有了想法後,至少是有這樣的底氣,去做這件事。
方子業聯絡了一下之前師父袁威宏帶自己去過的,漢市的那家大型動物試驗中心。
工作人員馬上說問一下。