將膠片進行掃描或拍照,用凝膠圖象處理系統分析目標帶的分子量和淨光密度值……
這個過程很複雜,也相對漫長,更需要耐心。
不過,方子業反正已經下了門診,來到實驗室裡,就一步一步地按部就班來做。且旁邊還有洛聽竹幫點小忙。
最後呈現出結果後,洛聽竹欣喜異常:“方師兄,你今天這個條帶顯示很清楚欸,上一次範師兄跑出來的是啞鈴狀的。”
說完,她偏頭看向方子業的成片,條帶清晰、沒有雜帶、背景乾淨!
“呈啞鈴狀一般配置膠有問題,另外還有一種可能是樣品中含有太多雜質,沒有離心下來,然後雜質沉積在孔的中間,蛋白自然被推擠到兩邊。”
“配好膠,不合格的堅決不用,不要鋌而走險。”方子業仔細想了一下原理,如此給洛聽竹解釋。
“那如果有條帶拖尾呢?”洛聽竹想了一下,又問了一個問題,應該是她跟著別人做的時候,看到過這樣的情況。
“條帶拖尾的話,一般是蛋白量濃度高或者,孵一抗濃度和時間太長。”
“蛋白含量高的話,可能是前期的文獻準備沒有確定好,我認為最有可能的是因為一抗濃度太高,作用時間太長引起。”
“當然也有其他原因。”方子業再次看了看自己的成片。
HK2與βactin(肌動蛋白)內參兩個條帶,共有過表達、正常以及沉默三個組。
腫瘤細胞實驗的內參,特別是涉及糖酵解通路的細胞實驗內參,是不能選用常見的GAPDH(甘油醛3磷酸脫氫酶)的。
&n進行作圖就可以用了吧?”洛聽竹繼續問。
“應該差不多吧,條帶的厚度灰度差距還是蠻明顯的。拍個照,拍個照……”方子業趕緊讓洛聽竹也幫忙拍一張。
洛聽竹欣然答應,靈動得如同一隻勤勞的小松鼠。
而方子業此時,看著學識點飛速跳動到了134,一下子增加了足足七十點的學識點,也是知道啊,這一次的WB實驗,在這一個課題之中的作用佔比不小,可能是支撐整個課題規模的小骨架了。
“這張照片拍得怎麼樣?”洛聽竹拍完後,問方子業。
方子業泛出姨母笑,而洛聽竹則以為自己拍照的水平還不錯,於是又咔咔地來了幾張。
然後就是清理實驗臺並清洗相應的實驗器材了。
一切結束,方子業建議:“洛師妹,辛苦了,一起去吃個宵夜吧?”
洛聽竹這會兒正在左右翻看著WB成圖的照片,歪著頭點了一下:“好呀。”
……